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        -86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應(yīng)用

        點(diǎn)擊次數(shù):3085    更新時(shí)間:2017-06-01

           隨著超低溫冰箱技術(shù)的不斷發(fā)展,超低溫冰箱在醫(yī)用領(lǐng)域也逐漸被廣泛應(yīng)用。例如-86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應(yīng)用,那就是冰凍切片環(huán)節(jié)中速凍,以減少冰晶形成。

            免疫組織化學(xué)染色中zui常用的一種切片方法,就是冰凍切片。它zui突出的優(yōu)點(diǎn),就是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性,尤其是細(xì)胞表面抗原,更應(yīng)采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。冰凍時(shí),組織中水份易形成冰晶,往往影響抗原定位。一般認(rèn)為冰晶少而大時(shí),影響較小,冰晶小而多時(shí),對組織結(jié)構(gòu)損害較大,在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。冰晶的大小與其生長速率成正比,而與成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小,對組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴(yán)重。因此,應(yīng)盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認(rèn)為冰凍開始時(shí),冰晶成核率較慢,以后逐漸增加,其臨界溫度為-33℃,從-30℃降至-43℃之間,成核率急劇增加達(dá)1018,然后再減慢?;谏鲜隼碚摽刹扇∫韵麓胧p少冰晶的形成。

        (1)速凍,使組織溫度驟降,縮短從-33℃到-43℃的時(shí)間,減少冰晶的形成。

        其方法有二:

        ①干冰-丙酮(酒精)法:將150-200ml丙酮(酒精)裝入小保溫杯內(nèi),逐漸加入干冰,直至飽和呈粘稠狀,再加干冰不再昌泡時(shí),溫度可達(dá)-70℃,用一小燒杯(50-100ml)內(nèi)裝異戊烷約50ml,再將燒杯緩慢置入干冰丙酮(純酒精)飽和液內(nèi),至異戊烷溫度達(dá)-70℃時(shí)即可使用。將組織(大小為1cm×0.8cm×0.5cm)投入異戊烷內(nèi)速凍30-60s后取出,或置恒冷箱內(nèi)以備切片,或置-86℃低溫冰箱內(nèi)貯存。

        ②液氮法:將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm),如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi),當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10-20s組織即迅速冰結(jié)成塊。取出組織冰塊立即置入-86℃低溫冰箱貯存?zhèn)溆?,或置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。

        -86℃低溫冰箱參數(shù):

        產(chǎn)品系列

        型號

        容積L

        溫度℃

        內(nèi)尺寸:寬×深×高mm

        外尺寸:寬×深×高mm

        功率W

        凈重Kg

        -86℃
        立式

        TF-86-30-LA

        30

        -25~-65

        270x265x400

        470x490x1120

        200

        60

        TF-86-60-LA

        60

        -25~-65

        364x405x409

        540x620x1115

        240

        75

        TF-86-80-LA

        80

        -40~-86

        380×410×500

        620×660×1275

        450

        80

        TF-86-158-LA

        158

        -40~-86

        380×415×1020

        620×660×1795

        500

        100

        TF-86-328-LA

        328

        -40~-86

        500×500×1300

        760×765×1975

        550

        170

        TF-86-400-LA

        400

        -40~-86

        500×600×1300

        760×865×1975

        650

        190

        TF-86-550-LA

        550

        -40~-86

        600×700×1300

        860×965×1975

        800

        220

        TF-86-638-LA

        638

        -40~-86

        700×700×1300

        960×965×1975

        1000

        250

        TF-86-750-LA

        750

        -40~-86

        800×700×1300

        1060×965×1975

        1200

        280

        TF-86-938-LA

        938

        -40~-86

        1000×700×1300

        1260×965×1975

        1700

        320

        -86℃
        臥式

        TF-86-50-WA

        50

        -40~-86

        440×350×315

        650×560×880

        350

        60

        TF-86-105-WA

        105

        -40~-86

        410×460×550

        1140×760×930

        400

        105

        TF-86-200-WA

        200

        -40~-86

        710×510×560

        1390×760×930

        500

        160

        TF-86-300-WA

        300

        -40~-86

        1010×510×580

        1690×760×930

        600

        180

        TF-86-480-WA

        480

        -40~-86

        1300×600×600

        1990×860×975

        700

        240

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